按照《国家药品监督管理局关于发布省级中药饮片炮制规范修订的技术指导原则的通告》（2018年第16号）等相关要求，我局组织起草了水蛭冻干粉质量标准，现向社会公开征求意见。各相关单位请于2023年9月29日前将反馈意见表（附件2）发送至电子邮箱zhucechu203@163.com，邮件标题格式为：单位名称+水蛭冻干粉反馈意见。

　　联系人：刘晶  联系电话：0451-88313116

　　附件：1.水蛭冻干粉质量标准（征求意见稿）

　　　　　2.反馈意见表

黑龙江省药品监督管理局

2023年8月30日

附件1

水蛭冻干粉

Shuizhi Dongganfen

本品为水蛭科动物蚂蟥Whitmania pigra Whitman经冷冻干燥而得的炮制品。

【炮制】取原药材，洗净，冷冻，粉碎，冻干，粉碎，分装即得。   

【性状】本品为灰白色至灰黄色粉末；气微腥，味微咸。

【鉴别】（1）取本品粉末1g，加乙醇10ml，超声处理15分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取水蛭对照药材1g，,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2020年版四部通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；紫外光灯(365nm)下显相同颜色的荧光斑点。

（2）取门冬氨酸、谷氨酸、苏氨酸、脯氨酸、丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、盐酸赖氨酸和酪氨酸对照品适量，精密称定，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml各含100μg的混合溶液，作为对照品溶液。照{含量测定}项下的方法自“精密量取对照品溶液1ml，置10ml量瓶中”，起依法制备对照品溶液，吸取上述对照品溶液及{含量测定}项下的供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品色谱中，应呈现与对照品色谱峰保留时间相对应的色谱峰。

峰1：门冬氨酸；峰2：谷氨酸；峰3：苏氨酸；峰4：脯氨酸；峰5：丙氨酸；

峰6：缬氨酸；峰7：异亮氨酸；峰8：亮氨酸；峰9：赖氨酸；峰10：酪氨酸

色谱柱：Kromasil 100-5-C8，4.6×250mm，5μm

推荐仪器：Thermofisher U3000高效液相色谱仪

【检查】水分 不得过10.0%（《中国药典》2020年版四部通则0832第二法）

总灰分 不得过8.0%（《中国药典》2020年版四部通则2302）

酸不溶性灰分 不得过2.0%（《中国药典》2020年版四部通则2302）

酸碱度 取本品粉末约1g，加入0.9%氯化钠溶液10ml，充分搅拌，浸提30分钟，并时时振摇，离心，取上清液，依法测定（《中国药典》2020年版四部通则0631），pH值应为5.0～7.5。

微生物限度 照非无菌药品微生物限度标准（《中国药典》2020年版四部通则1107、1108）测定，应符合规定。

【含量测定】 照高效液相色谱法（《中国药典》2020年版四部通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验 以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.06mol/L醋酸钠溶液（用冰醋酸调pH6.40）-乙腈（200:30）为流动相A；以乙腈-水（50:50）为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；柱温为40℃；流速为每分钟0.8ml；检测波长为360nm。理论板数按缬氨酸计算应不低于10000。

对照品溶液的制备 取缬氨酸对照品适量，精密称定，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml含100μg的溶液即得。

供试品溶液的制备 取本品约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入0.1mol/L盐酸溶液25ml，称定重量，水浴回流提取1.5小时，放置室温，称定重量，用0.1mol/L盐酸溶液补足减失重量，离心取上清液，滤过。精密量取续滤液2ml，精密加入盐酸2ml，105℃放置24小时。取出冷却后，转移至25ml量瓶中，加入6mol/L氢氧化钠溶液4ml，加0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度。摇匀，滤过。

精密量取对照品溶液和供试品溶液各1ml，分别置10ml量瓶中，加0.5mol/L碳酸钠缓冲液1.0ml和1%2,4-二硝基氟苯的乙腈溶液1.0ml，摇匀，60℃水浴放置60分钟。取出冷却后，加入0.02mol/L醋酸铵溶液至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法 精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每1g含缬氨酸(C₅H₁₁NO₂）不得少于14.0mg。

【性味与归经】咸、苦、平；有小毒。归肝、脾经。

【功能与主治】 破血通经，逐瘀消癥。用于血瘀经闭，癥瘕痞块，中风偏瘫，跌扑损伤。也可用于脑血栓、脑溢血、高黏血症、高脂血症、高血压病、肺心病等瘀血阻滞证。

【用法与用量】口服，一次0.3g～1.0g，一日三次。或遵医嘱。

【注意】孕妇禁用

【规格】0.3g/瓶

【贮藏】密封，置干燥处。

附件2

水蛭冻干粉质量标准（征求意见稿）反馈意见表

内容来源：官网